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    (1)CIK和NK细胞的高效扩增

        1和图2分别为使用本培养基和含5%FBS的某进口品牌商业无血清培养基培养PBMC(外周血单个核细胞),在四种经典细胞因子刺激下培养14天诱导成CIK细胞的扩增结果和扩增后的细胞表型,HIPP-T009中细胞扩增倍数可达到1000倍以上,CD3+CD56+细胞的比例在10%以上,CD3+CD8+的比例在50%以上,该结果和使用含5%FBS的商业无血清培养基培养的扩增效果和细胞表型接近。

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    1培养14天的CIK细胞扩增结果

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    2培养14天的CIK细胞表型流式结果

    图3和图4分别为使用本培养基和含5%FBS的某进口品牌商业无血清培养基培养PBMC(外周血单个核细胞),在滋养层细胞和IL-2刺激下培养14天诱导成NK细胞的扩增结果和扩增后的细胞表型,HIPP-T009中细胞扩增倍数可达到2000倍以上,CD3-CD56+细胞的比例在70%以上,该结果甚至优于含5%FBS的商业无血清培养基扩增的效果。

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    3 培养14天的NK细胞扩增结果

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    培养14天的NK细胞表型流式结果


    (2)细胞培养载体微球、结构可控支架材料和生物活性脱细胞基质等制备


        利用微乳化法制备具有可以调节多孔结构的球形载体,直径尺寸在几百微米,适合于动态条件下细胞接种与培养;利用溶液浇筑/粒子沥出法制备了孔径可控的三维多孔支架,并考察了间充质干细胞的贴附、生长与分化行为;利用静电纺丝法制备纤维尺寸可控的薄膜材料,应用于细胞培养实验;建立了脱细胞基质制备方法,并应用于生物支架材料的表面修饰活化,应用于软骨再生研究。

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    (3)基于组织微构重塑技术构建厘米级工程化骨组织


        基于组织微构重塑技术,利用骨髓间充质干细胞,在搅拌式生物反应器中大规模制备了骨微组织;进一步在自制的灌注生物反应器中组装骨微组织,构建的厘米级工程化骨组织内部细胞密度高,细胞和胞外基质分布均匀,无明显坏死区;当灌注培养时间延长至2周时,工程化组织中的细胞活性、组织结构及成骨分化等性能均有显著提升。动物实验结果显示,灌注2周形成的工程化骨组织在动物体内能够更好地维持移植物的形态、组织活性、胞外基质沉积和成骨特性,且机体的血管能侵入移植物中。

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